Asins grupu noteikšanas metodes, tabulas apraksts

Gandrīz katrs cilvēks vismaz vienu reizi savā dzīvē izturēja testu, lai noteiktu asinsgrupu. Šīs analīzes metodes un to ticamība tiks apspriesta tālāk..

Kāda ir diagnoze??

Asins grupa ir īpaša antigēnu sērija, kas atrodas uz sarkano asins šūnu virsmas, kas nosaka to specifiku. Ir zināmi daudzi šādi antigēni, tāpēc ir pieņemta vienota asins klasifikācija pēc ABO un Rh faktora..

Šis rādītājs obligāti tiek noteikts pacientiem pirms operācijas, militārajā, policijas un citās cilvēku kategorijās, kurām var būt nepieciešama steidzama asins pārliešana.

Standarta asinsgrupēšanas metode

Visizplatītākā metode šī indikatora izpētei ir metode, izmantojot standarta serumu. Šī diagnoze nosaka vispārpieņemtos antigēnus atbilstoši ABO sistēmai.

Izohemaglutinējošais serums ir īpašu antivielu kombinācija pret eritrocītu ārējām daļiņām. Ja tiek atrasts saderīgs antigēns, kuru antivielas var ietekmēt, tiek izveidots komplekss, kas veicina imūno aizsargmehānisma rašanos. Tā rezultātā eritrocītu asins šūnas salīp kopā (aglutinācija). Ja tas notiek, tad tiek secināts, ka asinis nav saderīgas..

Šie serumi ir izgatavoti no donoru asinīm saskaņā ar īpašu sistēmu, kas nozīmē plazmas ekstrakciju, kurā tā satur antivielas, un pēc tam to atšķaida ar izotonisko nātrija hlorīdu, un tas notiek vairākos posmos:

  • Tvertnē ielej 1 ml ūdens, kurā izšķīdina 0,9% parasto sāli.
  • Tajā pašā mēģenē pievieno tādu pašu daudzumu atšķaidītas plazmas..
  • Tad 1 ml šī šķidruma tiek ievietots traukā ar izotoniku.

Procesa rezultāts ir 1: 256. Ja tiek pārkāpta atšķaidīšanas metode, pastāv liela varbūtība iegūt kļūdainus rezultātus..

Pētījumu veikšana

0,1 ml katra seruma tiek uzklāts uz plāksnes virsmas vietā, kur tiek uzklāta vēlamā atzīme. Tad katram paraugam ņem 0,01 ml testa asinis. Un tad katrs seruma piliens tiek sajaukts ar asinīm.

Pēc piecām minūtēm tiek noteikta diagnoze. Testēšana tiek uzskatīta par pozitīvu, ja aglutinācijas reakcija ir pagājusi. Pamatojoties uz analīžu rezultātiem, tiek izveidota tabula, kurā tie tiek ievadīti..

Asins grupas testa rezultātu tabula, izmantojot standarta serumus.

Krusteniskās reakcijas tehnika

Šajā gadījumā aglutinogēna noteikšanai tiek izmantoti tsolikloni. Pretējā gadījumā standarta serumi ar paralēlo testa tehnoloģiju, pateicoties eritrocītu atsauces šūnām.

Šīs divas metodes ir ļoti līdzīgas viena otrai. Bet joprojām pastāv atšķirības.

Uz virsmas, uz kuras iepriekš tika ievietoti dažādi serumi, tiek uzklāts neliels piliens parasto eritrocītu. Tad asinis tiek sadalītas frakcijās, izmantojot centrifūgu. Formveida elementus pievieno standarta serumiem, un plazmas daļu pievieno standarta eritrocītu šūnām. Rezultātu novērtēšana tiek veikta pēc piecām minūtēm, un rādītāji ir norādīti tabulā.

Pateicoties šai tehnikai, tiek novērstas kļūdas pētījumā..

Metode, izmantojot tsoliclones

Ja ar standarta serumiem nav iespējams noteikt asins grupu, izmantojiet šo paņēmienu.

Tsoliklons - hibrīdu antivielas, kas iegūtas no peles asins B-limfocītiem.

Diagnostikas secība ir šāda:

  1. Pēc tam, kad uz plāksnes ir izdarītas atzīmes, kas atbilst tsoliclon tipam, tiek uzklāts šķīdums.
  2. Katram tsoliclon paraugam pievieno vienu pilienu diagnosticētu asiņu.
  3. Rezultātu novērtēšana piecās minūtēs.
  4. Šai tehnikai jāievēro īpaši nosacījumi. Tie ietver ciklonu piemērotību, istabas temperatūru un mitruma līmeni.

Testa rezultāti tiek uzskatīti par pozitīviem, ja, sajaucot šīs frakcijas, tiek novērota aglutinācijas reakcija. Ja tas notika divos paraugos, tad tiek uzskatīts, ka asinis pieder ceturtajai grupai. Ja reakcija vispār netiek novērota, tad uz pirmo. Diagnostikas kļūdas šajā tehnikā nav izplatītas..

Ātrs veids "Eritrotests"

Iepriekš minētās metodes medicīnā tiek izmantotas ilgu laiku un ir izplatītas visā pasaulē. Bet, ņemot vērā faktu, ka nozare pastāvīgi attīstās, tiek ieviestas ātras diagnostikas metodes, lai izveidotu piederību asins grupai. Eritrotests tiek uzskatīts par šādu jauninājumu..

Lai šādā veidā noteiktu indikatoru, jums jābūt šādam aprīkojumam:

  • 5 bedrīšu standarta plāksne
  • Skarifikators punkcijai un bioloģiskā šķidruma saņemšanai
  • Stikla pipete ar gumijas spuldzi
  • Pipete reaģentu aspirēšanai
  • Nūju sajaukšana

Galvenā eritrotesta priekšrocība ir tā, ka pētījums neprasa papildu nosacījumus un ir pieejams laikā, kad standarta diagnostika nav iespējama..
Veikšanas secība
Tabletes padziļinājumos tsoliclones tiek novietoti uz virsmas tipa antigēniem un galvenais, kas ir atbildīgs par Rh faktora iedzimtu pārnešanu. Pēdējai iedobei pievieno kontroles serumu, kas izslēdz kļūdainu rezultātu un pareizi norāda piederību vienai vai otrai grupai.

Analīzes rezultātu novērtēšana tiek veikta, izmantojot tabulu, kurā norādīti iespējamie testa rezultāti.

ABO klasifikācija

Asins grupa, tās noteikšana tiek veikta, pamatojoties uz īpaši izstrādātiem standartiem. Ir īpaša tabula, kas raksturo katru asins grupu..

Asins grupas noteikšanas metodes

Mūsdienu medicīnā asins grupa raksturo antigēnu kopumu, kas atrodas uz eritrocītu virsmas, kas nosaka to specifiku..

Šādu antigēnu ir ļoti daudz (parasti tiek izmantota asins grupu tabula ar dažādiem antigēniem), bet asins grupas noteikšana tiek veikta visur, izmantojot klasifikāciju pēc Rh faktora un AB0 sistēmas.

Grupas noteikšana ir obligāta procedūra, gatavojoties jebkurai operācijai. Šāda analīze ir nepieciešama arī, stājoties dienestā dažos kontingentos, tostarp militārajā jomā, iekšējo orgānu darbiniekos un tiesībaizsardzības aģentūrās. Šī aktivitāte notiek sakarā ar paaugstinātu dzīvībai bīstama stāvokļa risku, lai samazinātu laiku, kas nepieciešams palīdzības sniegšanai asins pārliešanas veidā..

Dažādu asins grupu asins sastāvs

AB0 sistēmas būtība ir antigēnu struktūru klātbūtne uz eritrocītiem. Plazmā nav tām atbilstošu tipisku antivielu (gamma globulīnu). Tāpēc asins analīzēm varat izmantot reakciju "antigēns + antivielas".

Eritrocīti salīp kopā, kad satiekas antigēns un antivielas. Šo reakciju sauc par hemaglutināciju. Analizējot, reakcija tiek parādīta kā mazas pārslas. Pētījuma pamatā ir aglutinācijas ar serumiem attēla iegūšana.

Eritrocītu "A" antigēni attiecīgi saistās ar antivielām "," un arī "B" ar "β".

Pēc sastāva izšķir šādas asins grupas:

  • I (0) - ά, β - eritrocītu virsma vispār nesatur antigēnus,
  • II (A) - β - uz virsmas ir antigēns A un antiviela β,
  • III (B) - ά - virsma satur B ar type tipa antivielu,
  • IV (AB) - 00 - virsma satur abus antigēnus, bet tai nav antivielu.

Asins grupu noteikšana

Embrijā jau ir antigēni embrija stāvoklī, un aglutinīni (antivielas) parādās pirmajā dzīves mēnesī.

Noteikšanas metodes

Standarta metode

Ir daudz paņēmienu, taču laboratorija regulāri izmanto serumu standarta noteikšanu.

Standarta seruma metodi izmanto, lai noteiktu AB0 antigēnu tipus. Standarta izohemaglutinējošā seruma sastāvs satur antivielu komplektu pret eritrocītu molekulām. Antigēna klātbūtnes gadījumā, kas ir uzņēmīgs pret antivielu darbību, veidojas antigēna-antivielu komplekss, kas sāk imūnreakciju kaskādi.

Šīs reakcijas rezultāts ir eritrocītu aglutinācija, pamatojoties uz notiekošās aglutinācijas raksturu, ir iespējams noteikt parauga piederību jebkurai grupai.

Standarta seruma pagatavošanai tiek izmantotas donoru asinis un īpaša sistēma - izolējot plazmu, ieskaitot antivielas, un pēc tam to atšķaidot. Atšķaidīšanu veic, izmantojot izotonisko nātrija hlorīda šķīdumu.

Audzēšana notiek šādi:

  • Pievieno 1 mililitru plazmas mēģenē, kas satur 1 ml pārtikas sāls 0,9% šķīduma. Rūpīgi samaisiet šķīdumu.
  • Tad iegūto plazmas šķīdumu ņem ar pipeti 1 mililitra tilpumā. Pievienojiet to mēģenei, kas satur izotonisku šķīdumu. Tāpēc nepieciešams panākt plazmas atšķaidījumu ar attiecību 1 pret 256. Citu atšķaidījumu izmantošana rada diagnostikas kļūdas risku.

Pats pētījums tiek veikts šādā veidā:

  • Katra seruma piliens (ar kopējo tilpumu aptuveni 0,1 mililitru) tiek novietots uz īpašas plāksnes uz laukuma, kur ir atbilstoša atzīme (tiek izmantoti 2 paraugi, no kuriem viens ir kontrole, otrais paredzēts pētījumiem)..
  • Pēc tam blakus katram seruma pilienam testa paraugu ievieto 0,01 mililitru tilpumā, pēc tam to atsevišķi sajauc ar katru diagnostikas.

Rezultātu dekodēšanas noteikumi

Pēc piecām minūtēm jūs varat novērtēt testa rezultātus. Lielos seruma pilienos notiek apgaismība, dažos notiek aglutinācijas reakcija (veidojas mazas pārslas), citās - nē.

Video: asins grupas un Rh faktora noteikšana

Šeit ir iespējas:

  • Ja abos paraugos ar II un III serumu (+ 1. un IV kontrole) nav aglutinācijas reakcijas - pirmās grupas noteikšana,
  • Ja recēšanu novēro visos paraugos, izņemot II - otrā definīcija,
  • Ja nav aglutinācijas reakcijas, tikai III grupas paraugā - III definīcija,
  • Ja koagulācija tiek novērota visos paraugos, ieskaitot IV kontroli - IV definīcija.

Kad serumi ir pareizā secībā un uz plāksnes ir paraksti, ir viegli orientēties: grupa atbilst vietām bez aglutinācijas.

Dažos gadījumos savienojums nav skaidri redzams. Pēc tam analīze ir jāpārstrādā, mikroskopā novēro nelielu aglutināciju.

Krusteniskās reakcijas metode

Šīs metodes būtība ir aglutinogēnu noteikšana, izmantojot standarta serumus vai tsoliklonus, paralēli nosakot aglutinīnus, izmantojot standarta eritrocītus.

Šķērsgriezuma analīzes tehnika praktiski neatšķiras no pētījuma, kurā izmantoti serumi, taču ir daži papildinājumi.

Pilienam pa pilienam pievieno standarta eritrocītus uz plāksnes zem serumiem. Pēc tam no mēģenes ar pacienta asinīm, kas iziet cauri centrifūgai, plazmu ekstrahē ar pipeti, kuru ievieto standarta eritrocītos, kas atrodas apakšā - pievieno standarta serumam..

Kā arī saskaņā ar standarta metodes tehniku, pētījuma rezultātus novērtē vairākas minūtes pēc reakcijas sākuma. Aglutinācijas reakcijas gadījumā mēs varam runāt par aglutinīnu AB0 klātbūtni, plazmas reakcijas gadījumā mēs varam spriest par aglutinogēniem.

Asins analīžu rezultāti, izmantojot standarta eritrocītus un serumus:

Aglutinācijas klātbūtne, reaģējot ar standarta izohemaglutinējošiem serumiemAglutinācijas klātbūtne, reaģējot ar standarta eritrocītiemAsins grupas
0 (es)A (II)B (III)AB (IV)0 (es)A (II)B (III)
-----++0 (es)
+-+---+A (II)
++---+-B (III)
+++----AB (IV)

nekādas reakcijas.

Cross-over metode ir ieguvusi popularitāti, pateicoties tam, ka tā novērš diagnostikas kļūdas, kas rodas, izmantojot standarta metodes.

Asins grupas noteikšana ar tsolikloniem

Cikloni ir sintētiski serumu aizstājēji, kas satur mākslīgus ά un β tipa aglutinīnu aizstājējus. Tos sauc par eritrotestiem "Tsoliklon anti-A" (ir rozā krāsā), kā arī par "anti-B" (ir zilā krāsā). Paredzētā aglutinācija tiek novērota starp tsoliklonu un sarkano asins šūnu aglutinīniem..

Šai tehnikai nav nepieciešamas divas sērijas, tā ir uzticamāka un precīzāka. Pētījumi un tā rezultātu novērtēšana tiek veikta tāpat kā standarta metodē..

Tsoliclon tipsAsins grupa
Aglutinācijas rezultātsAnti-AAnti-B
--0 (es)
+-A (II)
-+B (III)
++AB (IV)

IV grupu (AB) obligāti apstiprina aglutinācija ar tsoliclon "anti-AB", kā arī eritrocītu adhēzijas trūkums izotoniskā nātrija hlorīda šķīdumā.

Ekspress metode, izmantojot "Eritrotesta grupas karšu" komplektu

Lai arī vispāratzītās metodes asins piederības noteikšanai noteiktai grupai ir plaši izplatītas, mūsdienu medicīnā tiek ieviestas ātrās metodes, no kurām visizplatītākā ir "Erythrotest"..

Nosakot grupu, izmantojot metodi "Eritrotesta grupas kartes", ir nepieciešams instrumentu komplekts, ieskaitot šādas ierīces:

  • Plāksne ar pieciem caurumiem grupas noteikšanai pēc Rh piederības un AB0 sistēmas,
  • Skarifikators paredzēts pētījumam nepieciešamā parauga iegūšanai,
  • Stikla stieņi paraugu sajaukšanai,
  • Tīra pipete šķīduma savākšanai.

Visi uzskaitītie rīki ir nepieciešami diagnostikai bez kļūdām.

Asins analīzes komplekts "Eritrotesta grupas kartes" ļauj izpētīt Rh faktoru un noteikt asins grupu jebkuros apstākļos, tas ir īpaši efektīvs, ja nav iespēju izmantot parastās metodes.

Plāksnes akās ir antigēnu (tie ir anti-A, -B, -AB tsolikloni) un galvenā antigēna, kas izraisa Rh faktora (tas ir anti-D tsoliclon), mantojums. Piektajā caurumā ir kontrolreaģents, kas ļauj novērst iespējamās kļūdas un pareizi noteikt piederību asins grupai.

Asins grupu noteikšana ar standarta serumiem

Indikācijas: asins un tā sastāvdaļu pārliešanas nepieciešamība.

Priekšnosacījumi: telpa ar labu apgaismojumu un temperatūru no 15 ° līdz 25 ° C.

Aprīkojums: divi divu dažādu sēriju I (O), II (A), III (B) grupas hemaglutinējošu serumu komplekti un viena IV seruma (AB) ampula (katrā ampulā ar serumu iemērc sausu, tīru pipeti), pudele ar izotoniskā hlorīda šķīdumu. nātrijs ar pipeti, tīri mazgāta, sausa, speciāli marķēta vai fajansa plāksne, stikla slaidi, stikla stieņi, sterilas lance formas adatas pirksta mīkstuma caurduršanai, sterilas marles bumbiņas, spirts, smilšu pulkstenis 5 minūtes.

PosmiPamatojums
1. Pirms darba uzsākšanas nomazgājiet rokas, uzvelciet sterilus cimdus.Medicīniskā personāla infekcijas drošībai, strādājot ar asinīm.
2. Pārbaudiet, vai katrai standarta seruma ampulai ir pase - etiķete, kas norāda asins grupu, sērijas numuru, titru, derīguma termiņu, izgatavošanas vietu. Aizliegts lietot ampulu bez etiķetes. Serumam jābūt gaišam un caurspīdīgam, ampula neskarta, titrs nav mazāks par 1:32. Serumi tiek ievietoti īpašās plauktiem 2 rindās.Standarta serumi: I (O) - bezkrāsains - uz etiķetes nav svītru; II (A) - zils - uz etiķetes ir 2 zilas svītras; III (B) - sarkana - uz etiķetes ir 3 sarkanas svītras; IV (AB) - dzeltena - uz etiķetes ir 4 dzeltenas svītras. Pārslu klātbūtne, nokrišņi ir sūkalu nelietojamības pazīmes. Serumi, kuru derīguma termiņš ir beidzies, nav piemēroti lietošanai.
3. Standarta plāksnei vai plāksnei, kas ar krāsainu zīmuli sadalīta 4 kvadrātos, tiek uzklāts viens seruma piliens no divām sērijām I (O), II (A), III (B)..Uz plāksnes, kas sadalīta ar krāsainu zīmuli, katrā kvadrātā ir jānorāda asins grupa. Vienu divu sēriju I (O), II (A), III (B), IV (AB) seruma pilienu uzklāj uz standarta plāksnes vai ar krāsainu zīmuli sadala 4 kvadrātos, lai novērstu kļūdas rezultāta nolasīšanā..
4. Asins pilienu no mēģenes vai pirksta uzklāj ar pipeti vai stikla nūju vai apmēram katru seruma pilienu (asinīm jābūt 10 reizes mazākām nekā serumā) un sajauc ar dažādiem stikla stieņiem vai dažādiem stikla slaida stūriem..Lai iegūtu asinis no pirksta, pirksta spilventiņu apstrādā ar spirtu un ar adatu - šķēpu - izdara ādas punkciju. Pirmais asins piliens tiek noņemts ar marles lodi, kam seko dažādi stikla slaida stūri, lai izslēgtu viltus aglutinācijas reakciju.
5. Pēc sajaukšanas plāksni viegli sakrata ar rokām.Ātrākai un skaidrākai eritrocītu aglutinācijai.
6. Sākoties aglutinācijai, bet ne ātrāk kā pēc 3 minūtēm, katram seruma pilienam ar eritrocītiem pievieno 1 pilienu 0,9% nātrija hlorīda, kur ir sākusies aglutinācija, kratot plāksni, samaisa un turpina novērošanu, līdz ir pagājušas 5 minūtes..Ar pozitīvu izohemaglutinācijas reakciju līmēto eritrocītu pārslas un graudi neatšķiras, ja pievieno un maisa izotonisko nātrija hlorīda šķīdumu. Negatīvas reakcijas gadījumā sūkalu pilieni uz plāksnes ir caurspīdīgi, vienmērīgi rozā krāsā, nesatur pārslas un graudus..
7. Pēc 5 minūtēm nolasiet reakciju caurlaidīgā gaismā. Ja aglutinācija nav skaidra, seruma un asiņu maisījumam papildus pievieno vienu pilienu 0,9% nātrija hlorīda šķīduma, pēc kura tiek izdarīts secinājums par piederību grupai; ir iespējamas šādas 4 kombinācijas: a) visi trīs serumi abās sērijās neaglutējas. Pārbaudīt I (O) grupas asinis; b) negatīva izohemaglutinācijas reakcija ar I (O) un III (B) grupas serumu; II (A) grupu asins analīze; c) izohemaglutinācijas reakcija negatīva ar seruma III (B) grupu abās sērijās un pozitīva ar serumu I (O) un II (A) grupām. III (B) grupas testa asinis; d) I (O), II (A), III (B) grupas serumi dod pozitīvu reakciju abās sērijās. Asinis pieder IV (AB) grupai. Bet pirms šāda secinājuma izdarīšanas ar to pašu metodi ir jāveic izohemaglutinācijas reakcija ar IV grupas (AB) standarta serumu. Negatīva izohemaglutinācijas reakcija ļauj testa asinis galīgi piešķirt IV (AB) grupaia) aglutinācijas neesamība visos pilienos norāda, ka pētāmajās asinīs nav aglutinogēna, t.i. asinis pieder I (O) grupai; b) aglutinācijas sākums pilienos ar O (I) un B (III) serumu norāda, ka asinīs ir aglutinogēns A, t.i. asinis pieder II (A) grupai; c) aglutinācijas klātbūtne pilienos ar I (O) un II (A) grupas serumiem norāda, ka pētāmajās asinīs ir aglutinogēns B, t.i. asinis pieder III (B) grupai; d) aglutinācija visos pilienos norāda uz aglutinogēnu A un B klātbūtni pētāmajās asinīs, t.i. asinis pieder IV grupai (AB), tomēr, ņemot vērā to, ka nespecifiskas reakcijas dēļ ir iespējama aglutinācija ar visiem serumiem, uz plāksnes ir jāiepilina IV grupas (AB) seruma piliens un jāpievieno tam 1 piliens testa asiņu proporcijā 10: 1; serums un asinis tiek pārlietas un 5 minūtes novēro rezultātu. Ja aglutinācija nenotiek, tad pētāmās asinis tiek nodotas IV (AB) grupai.
8. Citu kombināciju identificēšana norāda uz nepareizu pacienta asins grupas noteikšanu.Vājas aglutinācijas gadījumā un visos šaubīgos gadījumos asinis tiek atkārtoti pārbaudītas ar citu sēriju standarta serumiem.
9. Kļūdas, nosakot asins piederību grupai un neatklātu aglutināciju, var būt saistītas ar: 1) vāju standarta seruma aktivitāti vai zemu eritrocītu aglutinējamību; 2) pārmērīgs testa asiņu daudzums, kas pievienots standarta serumam; 3) aizkavēta aglutinācijas reakcija augstā apkārtējā temperatūrā.Lai izvairītos no kļūdām: 1) izmantojiet aktīvo serumu ar pietiekami augstu titru 1:32; 2) pētīto asiņu un standarta seruma tilpuma attiecība 1:10; 3) pētījums tiek veikts temperatūrā, kas nav augstāka par 25 ° C; 4) novērtē rezultātus ne agrāk kā 5 minūtes pēc pētījuma; 5) stingri un rūpīgi jāievēro visi izpētes noteikumi.

Nr. 11.

1. problēma.

6 gadus vecs bērns tiek hospitalizēts ar diagnozi Ascariasis. Māsu pārbaudes laikā medmāsa saņēma šādus datus: sūdzības par sliktu dūšu, vemšanu, sāpēm nabas apvidū, apetītes zudumu, svara zudumu, ātru nogurumu, nemierīgu miegu, nakts bailēm. Slimo vairākas nedēļas.

Objektīvi: āda ir bāla, zemādas tauku slānis ir nepietiekami attīstīts, sāpes palpējot nabā. Izkārnījumi no zēna vārdiem bez patoloģijas.

Tikšanās:

1. Izkārnījumi uz I / tārpa

2. Vispārējs asins tests

3. Decaris 5 mg / kg vienu reizi, atkārtojiet pēc 7 dienām

Uzdevumi:

1. Atklāj apmierinātību, kādas vajadzības tiek pārkāptas un pacienta problēmas.

2. Paskaidrojiet pacienta bažas.

3. Nosakiet mērķus un plānojiet motivētu māsu intervenci

4. Kasīšana enterobiāzes gadījumā

2. problēma.

Pacients sūdzas par drudzi līdz 39 ° C, vājumu, vājumu visā ķermenī, muskuļu sāpēm, locītavu sāpēm, sāpēm, pārvietojot acs ābolus, sausu sāpīgu klepu, herpetiskus izvirdumus uz lūpām.

Objektīvi: paaugstināta mitruma āda, herpetiski izvirdumi uz augšlūpas, konjunktīvas hiperēmija, asarošana, hiperēmija rīkle, apgrūtināta elpošana plaušās. HR-86 1 minūtē, BP 110/70 mm Hg. Art. Aknas un liesa nav palielinātas. Fizioloģiskās aiziešanas bez pazīmēm.

Analizējot asinis: L - 4,5 * 10 9 / l, p / i - 3; s / i - 40; l-52; m-5; ESR-18 mm / stundā.

Uzdevums

1. Nosakiet pacienta problēmas, kuru apmierināšana ir traucēta; formulēt un pamatot pacienta problēmas.

2. Nosakiet mērķus un plānojiet motivētas māsu iejaukšanās.

Kā asins grupu nosaka standarta serumi, metodes un

Daudzos gadījumos neatliekamo medicīnisko palīdzību cietušai personai var sniegt tikai tad, ja asinis pieder AB0 klasifikācijai. Galu galā ir situācijas, kad asiņošanu nevar ātri apturēt, un pārliešana ir nepieciešama manipulācija pacienta reanimēšanai. Ārkārtas gadījumos grupu un Rh nav iespējams atpazīt.

Svarīgi ir arī veikt šādus pētījumus, plānojot un dzemdējot bērnu, lai noteiktu transfūzijas saderību un identificētu jaundzimušā hemolītiskās slimības risku, ko izraisa mātes un augļa asiņu nesaderība saskaņā ar AB0 sistēmu. Iespējamās atšķirības var izraisīt imūno konfliktus mātes ķermenī. Tāpēc ir vērts pēc iespējas agrāk zināt par teorētiski iespējamas slimības esamību vai neesamību..

Tam ir tūlītēji testi, lai noteiktu asins tipu..

  1. Noteikšanas metodes
  2. Sūkalu bāzes metodes būtība
  3. Metodes rādītāju noteikšanai
  4. Seruma izgatavošana
  5. Pētījumu veikšana
  6. Pētījumu rezultāti

Noteikšanas metodes

Mūsdienu medicīnas apstākļos ir zināmas vairākas metodes, ar kurām ir iespējams noteikt asins piederību vienai no grupām:

  • diagnostika, izmantojot tsoliklonu, kas darbojas kā indikators,
  • krusteniskās reakcijas tehnika,
  • eritrotests,
  • seruma standarta metode.

Tā ir pēdējā no šīm metodēm, kas visbiežāk atrod vietu pētījumos: seruma izmantošana asins grupas noteikšanai.

Sūkalu bāzes metodes būtība

Seruma metode ir laba gadījumos, kad papildu grūtību dēļ noteikt asins grupu (piemēram, imūndeficīts, vecuma faktors) ir nepieciešams diezgan plašs testu klāsts. Serums var samazināt daudzas dimensijas līdz vienai.

Hematoloģijas grupa nozīmē antigēnu kopumu, kas, atrodoties eritrocītos, nosaka to īpašības.

Antigēni pārstāv milzīgu vielu klāstu ar dažādām īpašībām un kvalitātes īpašībām, taču tās klasificē pēc divām sistēmām:

  • AB0 sistēma. Pārstāv divus eritrocītu antigēnus, apvienotus grupās - aglutinogēnus A un B, kā arī divas atbilstošās antivielas - a (anti-A) un b (anti-B). To kombinācija vai kombinācija savā starpā veido dažādas mūsdienās zināmas asins grupas (to ir 4). Atsevišķi izšķir vairākas to pašu antigēnu spēcīgo vai vājo variantu šķirnes. Piemēram, A1 antigēns, kura koncentrācija pārsniedz 80%, vai A2 antigēns 20%, un tā tālāk. Šādu teorētisko specifiku zināšanas ir domātas, lai novērstu kļūdas pētījumu rezultātos, kas var izraisīt nāvi, jo reanimācijas ārstēšanas shēma tiks pilnībā izjaukta, un ne vienmēr ir iespēja atrast jaunu donoru ar atbilstošo asins grupu.

Ir absolūti nepieciešams pārliet asinis, eritrocītus un plazmu, kas atzīmēta saņēmējā, lai pārliešanas laikā nenotiktu noraidīšanas reakcija. Īpaši steidzamās situācijās ir iespējams pārliet 0. grupas eritrocītus, kuriem nav grupas aglutinogēnu.

  • Rh faktora sistēma. Rh faktors ir vēl viens antigēns, ko apzīmē ar latīņu burtu D. Tas atrodas vai nu uz eritrocītiem (jebkuras AB0 grupas), vai arī nav. Pēdējā gadījumā persona tiek uzskatīta par Rh negatīvu. Ir arī citi Rh antigēni, taču tie ir daudz mazāk imunogēni, neizraisa noraidīšanas reakcijas un tāpēc netiek ņemti vērā.

Standarta serumi asins grupas noteikšanai ir īpaši šķīdumi, ko iegūst, ekstrahējot plazmu ar tajā esošām antivielām no donoru asinīm un atšķaidot, šim sastāvam pievienojot izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu..

Metodes rādītāju noteikšanai

Algoritms, kas nosaka asins grupas un Rh faktora noteikšanu pēc standarta serumiem, ir atkarīgs no vairākām manipulācijām.

Seruma izgatavošana

Loģiskākais un vispārpieņemtais seruma sagatavošanas procedūras solis ir iepriekš no donora iegūtās asinis mazgāt, lai novērstu svešķermeņu iekļūšanu saņēmēja ķermenī, kas vēlāk var izraisīt reakciju, kas izraisīs nepareizu rezultātu interpretāciju. Centrifugējot, attīrīta asins plazma ir gatava lietošanai seruma ražošanā.

Tālāk seko viņas audzēšana. Mēģenē pakāpeniski pievieno 1 ml asins plazmas, kurai vajadzētu saturēt 1 ml 90% pārtikas sāls. Tad iegūto šķīdumu rūpīgi sajauc.

No iepriekš iegūtā šķīduma ar pipeti tiek noņemts 1 ml plazmas, pēc kura to pievieno otrajam traukam, kas piepildīts ar izotonisku šķīdumu. Jāievēro stingra plazmas attiecība 1: 256. Pretējā gadījumā asins sastāvu turpmāko pētījumu laikā var noteikt nepareizi..

Ir loģiski atzīmēt, ka asins grupas noteikšanai paredzētie serumi pēc sastāva ir atšķirīgi. Kopumā vienam pētījumam katrai grupai tiek izmantoti trīs divu sēriju standarta serumi, kuru krāsa ir atšķirīga:

  • I (0) - nav krāsas,
  • II (A) - zils un III (B) - sārts.

Vienam pētījumam ir divi viena tipa serumi: vienu uzskata par kontroli, otrs faktiski kalpo pašam pētījumam.

Pētījumu veikšana

Asins grupas noteikšana ar serumiem tiek veikta stingri 15-25 grādu temperatūrā. Telpai, kurā notiek šī klīniskā izpēte, jābūt labi apgaismotai un paredzēta šādiem testiem. Lai to veiktu, mērījumiem būs jāsagatavo šādi piederumi un instrumenti:

  • iepriekš dezinficēti baltie trauki,
  • absorbējoša kokvilna,
  • zīmulis, kuram plāksne ir jāsadala tālāk sektoros,
  • īpašu glāžu un nūju komplekts,
  • trīs pipetes,
  • tieši standarta serumi, kurus attēlo 0 (I), A (II) un B (III) gr. asinis,
  • izotoniskais nātrija hlorīda šķīdums, jods un skudrskābes spirts pārstrādei.

Pētījumi katrai grupai tiek veikti ar atsevišķu pipeti, lai izslēgtu iespējamās diagnostikas kļūdas.

Kā aprakstīts iepriekš, asins grupas un Rh faktora noteikšana ar standarta serumiem balstās uz reakcijām, kas pētījuma periodā rodas ar sarkanajām asins šūnām. Tāpēc ir ļoti svarīgi uzraudzīt testa aprīkojuma un instrumentu stāvokli, kategoriski izvairoties no tiem esošā mitruma, kas iznīcina asins šūnu struktūru..

  • Trīs dažāda veida seruma paraugi tiek uzlikti uz plāksnes, iepriekš ar pipeti sadalīti trīs daļās (sektoros) ar zīmuli. Un pie katra piliena atzīmējiet šķīduma nosaukumu, kas atbilst asiņu tipam.
  • Pēc tam, kad seruma piliens ir uzlikts uz tam iezīmētā sektora, pipete nekavējoties jāievieto tajā pašā traukā, kurā tā iepriekš tika ievietota..
  • Tālāk seko pirksta apstrāde pirms asiņu ņemšanas, kas sastāv no vienkāršas ādas zonas dezinfekcijas ar medicīnisku spirtu. Tad asinis tiek ievadītas ar injekciju pirksta mīkstumā..
  • Iegūtais sarkanais šķidrums tiek savākts ar stikla slaidu vai nūju trīs pilienu daudzumā, kas nedrīkst pārsniegt vienkāršas šujmašīnas galvas izmēru. Atlasītos pilienus uzmanīgi pārnes uz šķīvja ar atlikušo serumu. Pēc šīs manipulācijas sāciet skaitīt laiku, izmantojot pulksteni.
  • Asinis maigi sajauc ar seruma šķīdumu, stingri ievērojot katra sektora robežas, izmantojot katrai nodaļai īpaši paredzētus stikla stieņus. Nūjas pēc vienas darbības jāaizstāj ar jaunām. Ir nepieciešams veikt atkārtotas manipulācijas, līdz iegūtās konsistences iegūst vienmērīgu rozā nokrāsu.
  • Pēc piecām minūtēm (laiku kontrolē pulkstenis), kad šķīdumi ir reakcijas stāvoklī, tiem pievieno izotonisko nātrija hlorīdu viena piliena daudzumā katrā sektorā. Tad plāksni nedaudz sakrata, lai asins paraugi sajauktos ar pievienoto sastāvu, bet ne pārāk daudz, lai paraugi nesajauktos kopā..

Šis solis ir pēdējais - pēc tam jūs varat novērot analīzes rezultātus, izmantojot serumu, lai noteiktu asins grupu.

Plašāku informāciju par asins grupas noteikšanu skatiet zemāk esošajā videoklipā:

Pētījumu rezultāti

Ja rezultāts ir pozitīvs, pirmajās minūtēs, pat pirms izotoniskā šķīduma pievienošanas, eritrocīti salīp kopā, kas izpaužas kā sarkano trombu parādīšanās reakcijas šķīdumā. Nākotnē šie graudi var saplūst viens ar otru, veidojot sarkanas "salas". Ja mēs runājam zinātniskā valodā, tā ir hemaglutinācija - līmēšanas process kopā ar turpmāku asins eritrocītu nogulsnēšanos.

Ja pēc manipulācijām šķīduma rozā krāsa palika nemainīga, tad loģiskā reakcija ir negatīva.

Pastāv vairāki modeļi, kas ir atkarīgi no pozitīvu un negatīvu reakciju kombinācijām serumos:

  • Ja nevienā no pētītajiem sektoriem nav pozitīvas reakcijas, tas nozīmē, ka saņēmējam ir 0 (I) asins grupa.
  • Ja seruma A (I) stāvoklis palika nemainīgs, un pārējie divi sniedza pozitīvu reakciju, tas nozīmē, ka subjekta asinīs ir A (II) grupa.
  • Negatīvas reakcijas gadījumā tikai uz B (III) no visiem trim, tiek teikts, ka recipientam ir asins grupa, uz kuru viņš "negāja", tas ir, B (III).
  • Ja katrā no trim šķidrumiem veidojas sarkani graudi, tad šādas asinis pieder AB (IV) grupai.

Iegaumēšanas ērtībai tiek izmantota diagramma vai tabula. Citu kombināciju rašanos sauc par kļūdainu, kas izriet no kļūdām pētījumā..

Ir vairākas šādas kļūdas:

  • Mērīšanai izmantota nepareiza koncentrācija asinīs. Parasti nepatiesus rezultātus iegūst, pārsniedzot noteikto likmi pievienošanai serumam.
  • Paņemto seruma paraugu statiskums vai nepareiza uzglabāšana izraisa neaktīvas reakcijas ar sarkanajām asins šūnām.
  • Zema temperatūra var izraisīt panaglutināciju, kas, kā likums, ir arī ļoti vāja..
  • Nepareiza laika dēļ seruma virsma var izžūt. Tas ir, pētījuma rezultāts kļūst gandrīz neredzams..

Asinsgrupas pētījuma veikšanas metode, izmantojot standarta serumus, ir visizplatītākā starp tūlītējiem pētījumiem ārkārtas situācijās. Tas padara to par nozīmīgāko un unikālāko mūsdienu medicīnā..

Vairākas standarta metodes asiņu veida un rēzus noteikšanai, ko izmanto privātajās un pašvaldību laboratorijās:

MedGlav.com

Medicīniskais slimību katalogs

Asins grupas. Asins grupas un Rh faktora noteikšana.

Asiņu grupas.


Daudzi pētījumi ir parādījuši, ka asinīs var būt dažādi proteīni (aglutinogēni un aglutinīni), kuru kombinācija (klātbūtne vai neesamība) veido četras asins grupas.
Katrai grupai tiek piešķirts simbols: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
Ir noskaidrots, ka var pārliet tikai vienas grupas asinis. Izņēmuma gadījumos, kad nav vienas grupas asiņu, un asins pārliešana ir vitāli nepieciešama, ir atļauta citu grupu asiņu pārliešana. Šādos apstākļos 0 (I) grupas asinis var pārliet pacientiem ar jebkuru asins grupu, un pacientus ar AB (IV) asins grupu var pārliet ar jebkuras grupas donoru asinīm.

Tāpēc pirms asins pārliešanas uzsākšanas ir nepieciešams precīzi noteikt pacienta asinsgrupu un pārlietās asins grupas..

Asins grupas noteikšana.


Asins grupas noteikšanai viņi izmanto 0 (I), A (II), B (III) grupas standarta serumus, kas īpaši sagatavoti asins pārliešanas staciju laboratorijās.
Uz baltas plāksnes, 3-4 cm attālumā no kreisās uz labo, ielieciet skaitļus I, II, III, kas apzīmē standarta serumus. Standarta seruma 0 (I) grupas pilienu ar pipeti ievada plāksnes sektorā, kas norādīts ar numuru I; tad ar otro pipeti uzliek seruma A (II) grupas pilienu ar numuru II; ņem arī grupas B (III) serumu un ar trešo pipeti uzklāj ar numuru III.

Tad priekšmetu sadursta ar pirkstu un plūstošās asinis ar stikla stieni tiek pārnestas seruma pilienā uz plāksnes un sajauc, līdz vienmērīgi iekrāsojas. Katrā serumā tiek pārnesta jauna nūja. Pēc 5 minūtēm no krāsošanas brīža (pa stundām!) Asins grupu nosaka pēc maisījuma izmaiņām. Serumā, kur notiek aglutinācija (eritrocītu līmēšana), ir skaidri redzami sarkani graudi un gabali; serumā, kur aglutinācija nenotiek, asins piliens paliks viendabīgs, vienmērīgi rozā krāsā.

Atkarībā no subjekta asins grupas noteiktos paraugos notiek aglutinācija. Ja subjektam ir 0 (I) asins grupa, eritrocītu līmēšana ar jebkuru serumu nenotiks.
Ja subjektam ir A (II) asins grupa, tad aglutinācija nebūs tikai ar A (II) grupas serumu un, ja subjektam ir B (III) grupa, tad nebūs aglutinācijas ar serumu B (III). Aglutināciju novēro ar visiem serumiem, ja analizējamās asinis ir AB (IV) grupa.

Rh faktors.


Dažreiz pat ar vienas grupas asiņu pārliešanu tiek novērotas smagas reakcijas. Pētījumi ir parādījuši, ka aptuveni 15% cilvēku asinīs trūkst īpaša proteīna, tā sauktā Rh faktora..

Ja šie cilvēki saņem otru asins pārliešanu, kas satur šo faktoru, rodas nopietna komplikācija, ko sauc par Rh-konfliktu, un attīstīsies šoks. Tāpēc šobrīd visiem pacientiem ir jānosaka Rh faktors, jo saņēmējam ar negatīvu Rh faktoru var pārliet tikai Rh negatīvas asinis..

Paātrināts veids, kā noteikt Rh piederību. Uz stikla Petri trauciņa tiek uzklāti 5 pilieni antirezusa seruma, kas pieder tai pašai grupai kā saņēmējs. Serumam pievieno pilienu subjekta asiņu un rūpīgi samaisa. Petri trauku ievieto ūdens vannā 42-45 ° C temperatūrā. Reakcijas rezultātus novērtē pēc 10 minūtēm. Ja notiek asins aglutinācija, tad subjektam ir Rh pozitīvas asinis (Rh +); ja nav aglutinācijas, tad pārbaudītās asinis ir Rh negatīvas (Rh—).
Ir izstrādātas vairākas citas metodes Rh faktora noteikšanai, jo īpaši izmantojot universālo anti-Rh reaģentu D.

Obligāti jānosaka asins grupa un Rh, kas pieder visiem slimnīcas pacientiem. Pētījuma rezultāti jāievada pacienta pasē.

Asins grupas noteikšana

1901. gadā izcilais zinātnieks Karls Landšteiners atklāja asins grupas un lika pamatus mūsdienu transfuzioloģijai. Pētnieks identificēja trīs grupas, pamatojoties uz dažādiem eritrocītu un asins seruma aglutinācijas reakcijas variantiem. Pētījuma materiāls tika ņemts no mūsu pašu laboratorijas darbiniekiem. Landšteinera studenti Dekastello un Stērlijs dažus gadus vēlāk atklāja ceturto grupu, taču uzskatīja to par apšaubāmu un izslēgtu no pētījumu rezultātiem. 1906. gadā Prāgas psihiatrs Jans Janskis apstiprināja AB (IV) grupas pastāvēšanu. Pētījuma publicēšana vietējā izdevumā gandrīz nemanīja. 1910. gadā pēc tam, kad Moss atkal atklāja ceturto grupu, Jans Janskis bija spiests pierādīt šī atklājuma pārākumu. Čehu zinātnieks ierosināja asins grupu digitālu apzīmējumu: I, II, III, IV.

Transfūzijas medicīnā dažādas eritrocītu antigēnu kombinācijas sauc par asins grupām. Antigēni ir ģenētiskas iezīmes: tie tiek mantoti no vecākiem un nemainās visu mūžu. 1980. gadā Starptautiskā asins pārliešanas kopiena izstrādāja skaitlisku terminoloģiju sarkano asins šūnu antigēniem. Piešķīra 23 asins grupu sistēmas, tostarp 194 antigēnus. Vairumā gadījumu numerācija atbilst noteikšanas kārtībai. Antigēni, kas iekļauti katrā no 23 sistēmām, tiek kodēti ar sešciparu skaitli: pirmie trīs cipari ir sistēmas numurs, pārējie trīs norāda antigēna specifiku sistēmā.

Sistēma Nr.NosaukumsApzīmējumsGēnu nosaukumsHromosomu lokalizācija
001AB0AB0AB09q34.1-q34.2
002MNSMNSGYPA, GYPB, GYPE4q28-q31
003PP1P122q11.2-qter
004RhRHRHD, RHCE1p36.2-p34
005LuterānisLULU19q12-q13
006KellKELKEL7q33
007LuissLEFUT319p33
008DafijsFYFY1q22-q23
009KiddJKJK18q11-q12
010DjegoDIAE117q12-q21
011YtYTACHE7q22
012XgXGXGXp22.32
013SciannaSCSC1p36.2-p22
014DombroksDARIDARInezināms
015KoltonsCOAQP17p14
016Landsteiner-WienerLWLW19p13.2-cen
017Čido / RodžersCH / RGC4A, C4B6p21.3
018HhHFUT119q13
019KxXKXKXp21.1
020GerbičsGIPC2q14-q21
021CromerCROMDAF1q32
022KnopsKNCR11q32
023indiānisINCD4411p13

AB0 asinsgrupu sistēma

Grupas piederība pēc AB0 sistēmas

AglutinogēniAglutinīni
0α un β
Aβ
Bα
AB
  • 0 (I): antigēnu A un B nav, tiek atklātas antivielas α un β (35 - 40% pasaules iedzīvotāju);
  • A (II): ir antigēns A un antivielas β (35%);
  • B (III): tika atrasti aglutinogēns B un aglutinīns α (15 - 20%);
  • AB (IV): aglutinogēnu A un B klātbūtne, aglutinīnu α un β trūkums (5–10%).

Pārvietojoties no rietumiem uz austrumiem no Eirāzijas, antigēna A noteikšanas ātrums samazinās, un antigēns B palielinās. Antigēns 0 Āzijā ir reti sastopams, taču tas ir plaši izplatīts Dienvidamerikas, Polinēzijas un Austrālijas pamatiedzīvotāju vidū. Iemesls ir infekcijas slimību epidēmijas.

Asins grupas noteikšanas rezultāts tiek ierakstīts slimības vēsturē vai donora kartē. Transfūzijas ārsts norāda datumu un paraksta.

Dažos gadījumos tipēšanas laikā tiek novērota viegla eritrocītu aglutinācija. Nepietiekami izteikta reakcija ir izskaidrojama ar vāju antigēnu A un B variantu klātbūtni. Vislielāko klīnisko nozīmi pārstāv A apakšgrupas1 un A2. Vājus variantus pirmoreiz 1911. gadā atklāja zinātnieki Dungerns un Hirselds. Vēlāk 1930. gadā Landšteiners un Levins ierosināja apakšgrupu nosaukumus - A1 un A2. A2 notiek līdz 20% A grupā un līdz 35% AB grupā. Sejas serums no asins paraugiem2 var saturēt anti-A1-antivielas: 2% gadījumu A grupā2 un 30% A2B. Antivielas pret A1 ir bīstami A grupas eritrocītu aglutinācijas dēļ.

A asins grupu noteikšanas metode2 un A2B

Eritrocītu noteikšanas ātrums A2 ievērojami atšķiras atkarībā no izmantotajiem reaģentiem. Šeit ir pētījumu rezultātu salīdzinājums, izmantojot dažādas metodes A asins grupu noteikšanai2 un A2B.

  • Anti-A1 (lektīns, fitohemaglutinīns). Diagnosticum skaidri (uz +++ / ++++) aglutinē A1 eritrocīti tūlīt pēc sajaukšanas ar paraugu. Aglutinē A2 vai izraisa nelielu aglutināciju piektajā minūtē vai vēlāk.
  • Standarta izohemaglutinējoši serumi.
  • Anti-A un anti-AB cikloni.
  • Tsoliklon anti-A vājš.
Analizētie paraugiA (II) asins grupaAB (IV) asins grupa
Analizētie paraugiA grupa2 (II) procentosAnalizētie paraugiA grupa2B (IV)%
Anti-A1 (lektīns, fitohemaglutinīns)159214.7357. lpp23.5
Cikloni: anti-A, anti-AB35992,1 *357. lpp7,03 *
Tsoliklon anti-A - vājš35874,5 *357. lpp11,2 *
Standarta izohemaglutinējoši serumi159217.434434.2

Piezīme: * - aglutinācija ir vāja, uz sārta fona ir mazi aglutināti.

Visaugstāko pētījumu precizitāti nodrošina Anti-A1 (lektīns, fitohemaglutinīns). Tests ir ieteicams, lai noteiktu antigēna A apakšgrupas bērniem līdz divu gadu vecumam. Iemesls ir jaundzimušo eritrocītu fizioloģiskais nenobriedums, kā rezultātā tika iegūti kļūdaini pētījuma rezultāti ar standarta izohemaglutinējošiem serumiem.

1930. gadā Landšteiners un Levins atklāja apakštipu Aint: starpposma variants starp A1 un A2. Šis antigēns ir raksturīgs nēģeriem un sasniedz 8,5% personām ar A asins grupu. Kaukāza iedzīvotājiem Aint novēroja tikai 1% cilvēku ar otro asins grupu. Īpaši retos gadījumos cilvēkam trūkst visu AB0 sistēmas antigēnu. Bombejas fenotips ir saistīts ar hh genotipu. Ja nav H antigēna, šīs kategorijas personām ir atrodamas anti-A un anti-B antivielas.

Asins grupu noteikšanas metode

Algoritms asins grupas noteikšanai ar hemaglutinējošiem serumiem

Lai noteiktu AB0 asinsgrupu ar tiešu metodi, tiek izmantotas divas standarta izohemaglutinējošu serumu sērijas. Sagatavojiet divas serumu partijas no trim grupām ar titru 1:32 vai lielāku. Katra seruma iegūšanai izmantojiet atsevišķu marķētu pipeti. Kontrolei sagatavojiet AB (IV) serumu.

  1. Nodrošiniet labu apgaismojumu un gaisa temperatūru 18 - 25 ° C.
  2. Atzīmējiet plāksni: 0 (I) - pa kreisi, A (II) - centrs, B (III) - pa labi. Augšpusē centrā norādiet donora vārdu vai analizējamo asiņu skaitu.
  3. Saskaņā ar plāksnītes marķējumu iedobiet iedobēs 1 - 2 pilienus (aptuveni 0,1 ml) seruma divās rindās.
  4. Izmantojot pipeti vai stikla stieni, blakus seruma pilieniem ievieto vienu nelielu pārbaudāmo eritrocītu pilienu. Seruma tilpumam jābūt aptuveni 10 reizes lielākam par eritrocītus saturošā šķidruma tilpumam.
  5. Maisojiet pilienus akās ar nūju.
  6. Lai paātrinātu reakciju, tableti viegli sakrata.
  7. Pēc trim minūtēm plāksnes iedobēs pievieno vienu pilienu NaCl, kurā ir sākusies aglutinācija. Pagaidiet vēl divas minūtes.
  8. Pēc piecām minūtēm novērtējiet reakcijas rezultātus garām. Vieglas aglutinācijas gadījumā pievienojiet vēl vienu pilienu NaCl.
  • Negatīva reakcija trīs iedobēs norāda uz antigēnu trūkumu uz testa parauga eritrocītiem. Asinis pieder pie 0 (I) grupas.
  • Aglutinācija urbumos ar 0 (I) un B (III) serumu norāda uz aglutinogēna A klātbūtni un pieder A (II) grupai..
  • Reakcijas sākšanās ar 0 (I) un A (II) serumu norāda uz antigēna B un B (III) grupas klātbūtni.
  • Reakcijas rezultāti visās iedobēs norāda uz aglutinogēnu A un B klātbūtni un atbilst ceturtajai AB (IV) grupai.

Pēdējā gadījumā jums jāpārliecinās, ka nav nespecifiskas reakcijas: uz plāksnes uzklāj 2-3 pilienus attiecīgās seruma grupas AB (IV) un pievieno vienu pilienu analizējamo eritrocītu. Maisiet šķidrumus un pēc piecām minūtēm novērtējiet rezultātu. Aglutinācijas neesamība norāda uz piederību AB (IV) grupai, klātbūtne ir nespecifiskas reakcijas pazīme. Šajā gadījumā, kā arī vieglas aglutinācijas gadījumā, atkārtojiet pētījumu ar citām serumu sērijām.

Metode asins grupas noteikšanai ar tsolikloniem

Monoklonālās antivielas pret eritrocītu antigēniem ir aizstājušas izohemaglutinējošos serumus. Katrai tipēšanai pietiek ar vienu anti-A, anti-B, anti-AB reaģentu partiju. Monoklonālo reaģentu ieviešana ir ievērojami vienkāršojusi un standartizējusi AB0 asins grupas noteikšanas metodi. Šeit ir ātrs soli pa solim pētniecības veikšana planšetdatorā.

  1. Nodrošiniet labu apgaismojumu. Darbs istabas temperatūrā.
  2. Pētījuma objekts ir eritrocītus saturoša vide.
  3. Etiķetes plāksnes akas: anti-A, anti-B, anti-AB vai izmantojiet plāksni ar marķētu uzlīmi.
  4. Katrā no trim iezīmētajām iedobēm izlej apmēram 0,1 ml piemērota monoklonāla reaģenta.
  5. Blakus katram diagnostikas pilienam pievieno apmēram 0,03 ml analizēto eritrocītu.
  6. Sajauciet reaģentu ar eritrocītiem iedobumos ar atsevišķiem atsevišķiem stikla stieņiem.
  7. Kratīt tableti apmēram trīs minūtes.
  8. Pārbaudiet, vai akās nav aglutinācijas.

Parasti reakcija tiek konstatēta jau pirmajās sekundēs pēc sajaukšanas. Tajā pašā laikā vāji antigēnu A un B varianti var dot vēlāku aglutināciju.

Asins grupas noteikšana ar netiešo metodi: darbību algoritms

Asinsgrupas noteikšanas metode ir balstīta uz iepriekš tipizētu 0, A, B grupas indivīdu eritrocītu vai vairāku vienas grupas donoru eritrocītu maisījuma ar izohemaglutinīnu α un β iedarbību pētītajā serumā.

Izmantojiet sausas, tīras pipetes ar katru tipēšanas reaģentu. Noskalo maisīšanas nūjas un pipetes 0,9% NaCl šķīdumā.

  • Sagatavojiet plāksni vai plāksni. Nodrošiniet labu telpas apgaismojumu.
  • Testa mēģenē savāc 3-5 ml asiņu bez stabilizatora. Ļaujiet sūkalām sēdēt 1,5 - 2 stundas istabas temperatūrā.
  • Izmazgājiet testa eritrocītus ar 0,9% fizioloģisko šķīdumu. Sagatavojiet 5% vircu.
  • Planšetdatorā atzīmējiet sadaļas: 0 (I), A (II), B (III).
  • Katrā no trim iedobēm ievieto 2 pilienus (apmēram 0,1 ml) analizētās plazmas.
  • Katrā iedobē pievieno apmēram 0,03 ml testa sarkano asins šūnu.
  • Izmantojot atsevišķas nūjas, sajauciet tipētās sarkanās asins šūnas ar serumu.
  • Viegli sakratiet tableti 5 minūtes.
  • Veikt aglutinācijas testa rezultātu vizuālu novērtējumu caurlaidīgā gaismā.

Secinājums par piederību grupai

Plazmas rezultāti ar standarta eritrocītiemPiederība grupai
0 (es)A (II)B (III)
-++0 (es)
--+A (II)
-+-B (III)
---AB (IV)

+ - aglutinācijas klātbūtne, - - negatīvs reakcijas rezultāts.

  • 0 (I): reakcija A (II), B (III) iedobumā (konstatētas α un β antivielas).
  • A (II): aglutinācija ar eritrocītiem B (III) (konstatēti β aglutinīni).
  • B (III): aglutinācija A (II) caurumā (noteikti a aglutinīni).
  • AB (IV): neviena reakcija neizraisa visas akas (plazmā nav konstatētas antivielas).

Rēzus sistēma

Levīns un Stetsons rēzus antigēnus atklāja 1939. gadā. Zinātnieki pētīja hemolītisko reakciju attīstības cēloņus sievietēm dzemdībās, veicot transfūzijas sievietēm ar identiskiem vīru eritrocītiem AB0, MN un P. sistēmās. Gadu vēlāk Landšteiners un Vīners ražoja antivielas, imunizējot trušus ar rēzus pērtiķu eritrocītiem. Antivielas sauc par anti-RH antivielām. Iegūtie aglutinīni ieguva aglutinācijas reakciju ar rēzus pērtiķu eritrocītiem un 85% baltās rases ņujorkiešu eritrocītiem. Antigēnu, kas izraisīja antivielu veidošanos, sauc par RH faktoru (D faktoru).

Retos gadījumos cilvēka sarkanās asins šūnas nesatur rēzus antigēnu. Fenotipu apzīmē ar Rhnulle. Gēns Xro šajā gadījumā tas tiek uzrādīts homozigotiskā formā un nomāc visu antigēnu veidošanos. Rh fenotipsnulle neizrāda aglutinogēnu aktivitāti, bet tām piemīt spēja pārnest antigēnus pēc mantojuma.

Starp eiropiešiem Rh pozitīvais biežums D antigēnam ir 85%. Sarkano asins šūnu membrāna parasti satur apmēram 10 000 - 30 000 D. Molekulas ir divi īpaši D-pozitīvo personu veidi: D u (vāja) un D daļēja (daļēja). Imūnā sistēma D u un D daļēja spēj radīt anti-D antivielas.

Vājš antigēns rodas 1,5% Rh pozitīvu cilvēku, un to raksturo mazs skaits (100-500) D molekulu uz membrānas. Tas ir imunogēns Rh negatīvām personām. Šajā gadījumā D pozitīvu eritrocītu pārliešana pacientiem ar vāju D var izraisīt donora asins šūnu sensibilizāciju. Eritrocīti ar D u ir vāji aglutinēti vai vispār nenonāk tiešā aglutinācijas reakcijā ar pilnīgām anti-Rh antivielām. Rh piederības noteikšana tiek veikta netiešā antiglobulīna testā. D u nesēji tiek uzskatīti par Rh pozitīviem donoriem un Rh negatīviem recipientiem.

Daļējs D ir nepietiekams vienā vai vairākos olbaltumvielu molekulas epitopos. Cilvēku ar D daļēju imūnsistēma spēj radīt antivielas pret trūkstošajiem epitopiem. Starp daļēja antigēna nesējiem izšķir septiņas personu grupas. Vislielākā klīniskā nozīme ir D VI pārnešanai (ir tikai Z epitops): šīs kategorijas īpašnieki ražo antivielas pret nemainīto antigēnu un daļējiem antigēniem D I - D V, D VII. Rh faktora D VI noteikšanas paņēmiens sastāv no divu diagnostiku secīgas izmantošanas: monoklonālas IgM anti-D antivielas (tsoliklone Anti-D-Super vai Anti-D IgM) un poliklonālas vai monoklonālas IgG anti-D antivielas (standarta universāls reaģents vai tsoliklon Anti -D). Negatīvs reakcijas rezultāts pētījuma pirmajā un pozitīvs rezultāts otrajā pētījuma posmā norāda uz D VI noteikšanu. Parasti D VI kategorija atbilst genotipam CcDee. Grūtniecēm ar D VI, pārvadājot augli ar pilnu D, tiek nozīmēts anti-rēzus imūnglobulīns.

Antivielas pret rēzus antigēniem ir imūnas. Rodas izosensitizācijas dēļ. Specifiskumu nosaka antigēni, kas provocē antivielu veidošanos. Izolējiet pilnīgas un nepilnīgas antivielas.

Pilnīgas ir IgM antivielas. Viņiem ir liela molekulmasa, un tie tiek atrasti retāk nekā nepilnīgas antivielas. Spēj aglutinēt Rh pozitīvos eritrocītus. Ir mazāk svarīgi pārliešanai.

Nepilnīgi pārsvarā pieder IgG klasei. Tie ir fiksēti uz Rh pozitīvo eritrocītu virsmas bez aglutinātu veidošanās. Asins šūnu saistīšana tiek veikta koloidālu šķīdumu un proteolītisko enzīmu klātbūtnē vai pēc apstrādes ar antiglobulīna serumu. Viņiem ir mazāka molekulmasa, salīdzinot ar pilnīgām antivielām. Spēj šķērsot placentu. Sensibilizācijas laikā vispirms tiek ražotas pilnīgas antivielas, pēc tam lielākā mērā tiek ražotas nepilnīgas (IgG imūnglobulīni) antivielas..

Rh faktora noteikšanas paņēmiens, izmantojot Anti-D-Super tsoliklonu

Tsoliklon Anti-D-Super ir pilnīga anti-D IgM cilvēka antiviela. Lai iegūtu ticamus rezultātus, analizētajā paraugā jābūt pietiekamam skaitam sarkano asins šūnu..

  1. Nodrošiniet labu apgaismojumu un istabas temperatūru telpā.
  2. Ielieciet uz plāksnes vienu lielu pilienu (apmēram 0,1 ml) Anti-D IgM.
  3. Netālu novietojiet vienu nelielu pilienu (aptuveni 0,03 ml) testa sarkano asins šūnu.
  4. Sajauc divus pilienus ar sterilu nūju.
  5. Pēc 10 - 15 sekundēm maigi šūpojiet plāksni 20 - 30 sekundes.
  6. Trīs minūtes pēc sajaukšanas pārbaudiet aglutināciju.

Reakcijas gadījumā asinis tiek vērtētas kā Rh pozitīvas (Rh +), reakcijas neesamības gadījumā - kā Rh negatīvas (Rh-). Negatīvas vai vājas aglutinācijas gadījumā pētījums jāveic atkārtoti ar nepilnīgām anti-D IgG antivielām, lai identificētu vāju vai daļēju D antigēnu..

Rh koeficienta D u noteikšanas metode mēģenē

Paralēli analīzei tiek veikti trīs kontrolparaugi: tsoliklon Anti-D (anti-D IgG) reaģents ar standarta Rh-pozitīviem un Rh-negatīviem eritrocītiem, eritrocīti analizēti ar želatīna šķīdumu bez anti-D IgG diagnosticum.

  1. Testa mēģenē ievieto 0,05 - 0,1 ml (vienu pilienu) eritrocītu no sarecējuša asins recekļa vai mazgā no konservanta.
  2. Pievieno 0,1 ml (divus pilienus) 10% želatīna, kas sasildīts līdz sašķidrināšanai 45–50 ° C temperatūrā.
  3. Pievieno vienu pilienu Anti-D (anti-D IgG) zolikona.
  4. Sajauc.
  5. Inkubē mēģeni 10-15 minūtes ūdens vannā vai pusstundu inkubatorā 48 ° C temperatūrā.
  6. Pievieno 5 - 6 ml izotoniskā šķīduma.
  7. Apgrieziet mēģeni 1 - 2 reizes.
  8. Novērtējiet aglutinācijas klātbūtni caurlaidīgā gaismā.

Reakcijas ar anti-D IgM un izteiktas aglutinācijas ar anti-D IgG rezultātu neesamība norāda uz antigēna D vāju formu noteikšanu. Vājas aglutinācijas gadījumā pētījums jāatkārto netiešajā Kumbsa testā..

Rh-piederības noteikšana ar standarta universālo reaģentu

Standarta reaģents antiresus Rh0D satur poliklonālas nepilnīgas anti-D antivielas. Paralēli parauga analīzei tiek veikts Rh reaģenta kontroles pētījums0D ar standarta Rh pozitīviem (vienas grupas vai 0 grupas) un Rh negatīviem (vienas grupas) eritrocītiem.

  1. Caurules apakšpusē ievieto vienu Rh diagnosticum pilienu0D.
  2. Pievieno vienu pilienu analizēto sarkano asins šūnu.
  3. Kratiet mēģeni vairākas reizes.
  4. Nolieciet mēģeni gandrīz horizontāli un lēnām pagrieziet vismaz 3 minūtes. Satura izkliedēšana gar sienām nodrošinās izteiktāku reakcijas rezultātu. Parasti aglutinācija notiek pirmajās 60 sekundēs. Nepieciešams laiks, lai noteiktu vāju antigēnu D u.
  5. Pievieno 2 - 3 ml izotoniskā NaCl šķīduma un mēģeni 2 - 3 reizes apgāž bez kratīšanas.
  6. Vizuāli novērtējiet aglutinācijas klātbūtni. Izteiktas pārslas uz dzidra šķīduma fona norāda uz antigēna D klātbūtni. Vienmērīgi krāsains šķidrums norāda uz antigēna neesamību.

Rezultāts tiek uzskatīts par uzticamu tikai pēc kontrolparaugu pārbaudes: reakcijas sākšanās ar standarta Rh pozitīvu un bez reakcijas - ar Rh negatīviem eritrocītiem.

Informāciju par netiešā Kumbsa testa pakāpenisku formulēšanu, izmantojot nepilnīgas anti-D antivielas, skatiet vietnes sadaļā “Kumbsa reakcija”..